Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
Робастность (robustness) - это способность аналитической методики не подвергаться влиянию малых, задаваемых (контролируемых) аналитиком изменений в условиях выполнения методики. Робастность является показателем надежности методики при ее использовании в указанных условиях.
В. ПРОВЕДЕНИЕ ВАЛИДАЦИИ АНАЛИТИЧЕСКИХ МЕТОДИК
1. Введение
Главной задачей валидации аналитической методики является экспериментальное доказательство того, что данная методика пригодна для достижения тех целей, для которых она предназначена. В отчет по валидации должны быть включены все данные, полученные в процессе валидации, и использованные для расчетов формулы с соответствующим их обсуждением.
Подходы к проведению валидации методик анализа биологических и биотехнологических препаратов могут быть иными, чем указано в данной статье.
При проведении валидации необходимо использовать только стандартные образцы с известными характеристиками, подтвержденными документально. Необходимая степень их чистоты зависит от задач, которые решаются при их использовании.
Последовательность рассмотрения валидационных характеристик отражает процесс, по которому может разрабатываться и валидироваться аналитическая
методика. Однако целесообразно планировать эксперимент так, чтобы соответствующие валидационные характеристики изучались одновременно, например: специфичность, линейность, диапазон применения, правильность и точность.
2. Специфичность
Исследование специфичности проводится при валидации испытаний на идентификацию, контроль примесей и количественное определение. Способ подтверждения специфичности зависит от задач, для решения которых предназначена аналитическая методика.
В тех случаях, когда методика недостаточно специфична, применяют сочетание двух или более аналитических методик для достижения необходимого уровня избирательности.
2.1. Идентификация. Испытания на идентификацию должны обеспечивать возможность различать соединения близкого строения, которые могут присутствовать в образце совместно с определяемым компонентом. Избирательность методики может быть подтверждена получением положительных результатов (возможно, путем сравнения с известным стандартным образцом) для образцов, содержащих определяемый компонент, и отрицательных результатов, полученных для образцов, не содержащих его. Для подтверждения отсутствия ложноположительных результатов испытание на идентификацию может быть проверено для веществ с близким строением, или сопутствующих анализируемому веществу. Выбор потенциально мешающих проведению испытания веществ должен быть обоснован.
2.2. Количественное определение и испытания на примеси. При валидации хроматографических методик для подтверждения специфичности должны использоваться характерные хроматограммы с указанием индивидуальных веществ. Аналогичный подход используют и для других методов разделения.
Для хроматографических методик степень разделения должна быть исследована для соответствующих концентраций веществ. Для подтверждения специфичности может быть использована степень разделения двух наиболее близко элюирущихся веществ.
В случае использования неспецифичного метода количественного определения необходимо применять дополнительные аналитические методики и подтверждать специфичность всего комплекса методик. Например, если количественное определение проводится титриметрическим методом, то его можно дополнить соответствующим испытанием на примеси.
Для количественного определения и для испытаний на примеси применяют одинаковые подходы, описанные ниже.
2.2.1. Образцы примесей имеются. Для метода количественного определения необходимо подтвердить избирательность определения анализируемого вещества в присутствии примесей и/или других компонентов образца. Это можно сделать внесением в образец (субстанцию или лекарственное средство) примесей и/или других компонентов образца в соответствующей концентрации и последующего доказательства того, что это не отразилось на получаемом результате (путем сравнения результатов, полученных на исходном и загрязненном образцах).
Для испытаний на чистоту подтверждение избирательности проводят путем загрязнения субстанции или готового лекарственного средства соответствующи-
ми количествами примесей и доказательства разделения этих примесей как друг от друга, так и от других компонентов образца.
2.2.2. Образцы примесей отсутствуют. В случае, если образцы примесей или продуктов разложения отсутствуют, подтверждение специфичности проводят путем сравнения результатов анализа образцов, содержащих примеси или продукты разложения, предлагаемой методикой и другой арбитражной методикой. В качестве последней может быть использована фармакопейная методика или другая валидированная методика. Этот подход предполагает предварительное загрязнение образца продуктами разложения путем выдерживания его в стрессовых условиях: воздействие света, тепла, влажности, гидролиза, окисления и т.п.
При валидации количественного определения следует сравнить результаты анализов, полученных с использованием валидируемой и арбитражной методик.
